Хламидии методом пцр это подготовка к анализу -

Показания для ПЦР

Основа работы полимеразной цепной реакции – это многократное дублирование фрагментов цепочки ДНК, соответствующих заданным требованиям. ДНК берётся из биоматериала пациентов: слюны, мочи или крови. В ходе работы на выделенный биоматериал воздействуют с помощью реагентов.

Распространённое назначение ПЦР – выявление хламидиоза при проявлении симптомов или при подозрении на болезнь.Также врач может назначить ПЦР, чтобы подтверждать или опровергать наличие гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции, герпеса, кандидоза и других вирусных и грибковых инфекций мочеполовой системы.

Важно отметить, что выявление хламидиоза – не единственное назначение процедуры. Также её используют для:

  • определения предрасположенности к некоторым патологиям;
  • определения степени родства (чаще всего проводится тест на отцовство);
  • клонирования определённых генов с необходимыми характеристиками;
  • выделения ранее отсутствовавших генов (например, мутировавших);
  • выявления причин бесплодия и выкидыша.

Чаще всего ПЦР на хламидии назначается при следующих ситуациях:

  • при вынашивании ребенка;
  • в случае диагностирования заражения хламидиями полового партнера;
  • при бесплодии неизвестной причины;
  • при выраженной хламидийной симптоматике.
В последнее время во всех учреждениях, наблюдающих беременных женщин, рекомендуется обязательно сдавать анализ на хламидии методом ПЦР. Это обуславливается тем, что хламидиоз коварное и опасное заболевание.

При бессимптомном течении оно может передаваться плоду вертикальным путем, то есть через плаценту, либо непосредственно вовремя родов при прохождении ребенком родовых путей. Мать заражает ребенка не зная об этом.

Способен хламидиоз привести и к преждевременным родам.

При обнаружении в образцах будущей матери патогенного микроорганизма, женщине назначается лечение. Его основой станет использование антибактериальных средств — антибиотиков, безопасных и для будущей роженицы, и для еще не родившегося ребенка.

Ход реакции

Ход реакции

Проведение ПЦР включает в себя отдельных 20-20 циклов, каждый из которых включает в себя три отдельные стадии. В самом начале двухцепочечную ДНК-матрицу подогревают до 96 градусов на протяжении нескольких минут, чтобы цепи окончательно разошлись.

Когда цепи расходятся, температуру воздействия снижают. Это позволяет специальному праймеру связаться с одноцепочечной матрицей. Эту стадию принято называть отжигом. Рабочая температура на этом этапе зависит от вида праймера, обычно назначается на 4-5 градусов ниже, чем температура плавления. На этой стадии клетки ДНК проводят 1-2 минуты.

Во время ПЦР происходит реплицирование матричной цепи за счет воздействия праймером. Эту стадию принято называть элонгацией. Рабочая температура на этом этапе полностью зависит от полимеразы. В большинстве случаев эти препараты показывают высокую активность уже при 72 градусов.

Длительность процедуры зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и длинны амплифицируемого фрагмента. В большинстве случаев на одну минуту ставят несколько тысяч пар оснований. Когда все циклы будут завершены, врач проводит дополнительную или финальную элонгацию.

Исследование на хламидиоз методом ПЦР — особенности и подготовка

Инфекционные заболевания довольно опасны и всегда неприятно поражающие наш организм. При проникновении любого вида инфекции в наш организм, начинаются неприятные симптомы и ухудшается самочувствие. Большинство болезней, которые изучены учеными имеют инфекционную природу поражения. Как же их определить?

С этой целью был разработан метод ПЦР, позволяющий выявлять вид инфекционного агента в человеческом организме. Благодаря такому методу диагностика заболеваний шагнула далеко вперед за счет высокой точности получаемого результата.

Изучая страницы истории, связанные с получением новых методов диагностики различных заболеваний, можно сделать вывод, что наиболее значимые из них были открыты в двадцатом веке. Именно в тот момент науку шагнула далеко вперед, в том числе и в нашей стране.

Выявляя ПЦР (полимеразную цепную реакцию) у организма, можно диагностировать и имеющиеся в нем патологии инфекционной природы появления. Впервые данный метод был заложен в далеких семидесятых годах прошлого столетия. Работы над данным методом связаны с именем Кери Мулисома, ученого, работающего в Америке.

Благодаря его исследованиям был открыт способ использования полимеразной цепной реакции на молекулах дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК).

Это привело к развитию новой области в медицине, связанной с молекулярной структурой организма. Позднее К. Мулис был номинирован за это открытие на получение Нобелевской премии, которая была ему впоследствии и присвоена.

Первые работы с ПЦР проводились как эксперименты исключительно в лабораторных условиях. Причиной этому было недостаточное его изучение и полное отсутствие практики. С течением времени, когда метод довольно глубоко апробировался, было создано специальное устройство для ПЦР.

Это оборудование не сегодняшний день довольно широко используется во многих клиниках и больницах. Сегодня без донного метода просто не возможно определение диагноза многих заболеваний, возникающих по причине проникновения в организм инфекционных частиц.
  • Хламидия, качественное определение ДНК, ПЦР
  • Хламидия, количественное определение ДНК, ПЦР
  • Хламидия, качественное определение рибосомальной РНК методом NASBA
  • Хламидия, полуколичественное определение антител класса IgG, ИФА
  • Хламидия, полуколичественное определение антител класса IgА, ИФА
  • Хламидия, качественное определение антител класса IgМ, ИФА

Для оптимального выбора исследований обращайтесь к своему лечащему врачу.

*Федеральные клинические рекомендации. Болезни кожи. Инфекции, передаваемые половым путем. 2016 г.

Особых подготовлений к процедуре не потребуется. Но есть ряд предписаний, выполнение которых обязательно перед забором образца. Это позволит получить максимально достоверный результат.

Среди них:

  • перед сдачей анализа необходимо ограничить половою жизнь (минимум 3 недели);
  • за месяц до забора образца нужно прекратить прием любых антибиотиков, способных каким-либо образом повлиять на хламидии;
  • в день процедуры категорически не рекомендуется использование антибактериальных средств при гигиенических процедурах, особенно в области половых органов;
  • за неделю до сдачи образца нужно прекратить использование любых местных препаратов, обладающих антибактериальным средством (свечи, крема, растворы для спринцевания).

При необходимости исследования методом ПЦР крови, правила подготовки включают следующее:

  • после пробуждения и до сдачи образца для исследования, запрещено употребление любой пищи, жидкости и даже использование жевательной резинки;
  • за день до анализа необходимо разгрузить ЖКТ, употребляя исключительно постную пищу;
  • если прием лекарственных препаратов не является жизненно необходимым курсом, следует ограничить прием любых медикаментов за сутки до анализа.

Анализ мочи на полимеразную цепную реакцию требует соблюдения следующих рекомендаций:

  • для исследования нужен первый утренний образец;
  • материал следует поместить в герметичный контейнер, который можно приобрести в любой аптеке;
  • перед сбором образца тщательно подмываются наружные половые органы;
  • чтобы избежать смешивания материала с выделениями из влагалища, женщинам следует прикрыть его ватным тампоном на время сбора.

Это может повлечь за собой либо необходимость повторной сдачи анализа, либо возможность назначения неверного курса лечения, со всеми вытекающими последствиями.

Клинический материал для ПЦР

Для выявления хламидиоза у мужчин берётся сперма, мазок из уретры или секрет простаты. У женщин необходим мазок из влагалища, уретры или цервикального канала. В некоторых случаях вместо мазка женщинам нужно сдавать кровь, именно во время менструаций или беременности.

Кровь для ПЦР- исследования нужно сдавать в лаборатории или процедурном кабинете. Для обоих полов процедура проходит по одинаковому алгоритму: лаборант вводит иглу в крупную вену на локтевом сгибе и наполняет пробирку.

Если есть подозрения на половое заражение хламидиозом, то нет смысла брать мазок – вместо него небольшое количество слизи и тканей соскабливаются с поражённого органа. При трахоме также необходим соскоб с конъюнктивы глаза.

Мазок забирается в кабинете уролога (для мужчин) или гинеколога (для женщин). Для этого врач пользуется специальным оборудованием – зондом или ложечкой, при этом приспособления должны быть стерильными.

После этого биоматериал помещают в пробирки, куда добавляются реагенты. Далее, пробирки ставятся в специальный прибор, и лаборант задаёт необходимые параметры исследования. Метод ПЦР – автоматический, поэтому результат получается быстро.

Как правило, при обнаружении хламидиоза врач назначает ИФА – анализ для определения фазы заболевания.

Чтобы провести анализ ПЦР, врачу необходимо взять небольшое количество биологического материала. В его качестве может выступать кровь, образцы тканей, а также некоторые биологические жидкости. Специалист сам выберет, какой материал лучше всего использовать конкретно в вашем случае.

Помните, что ПЦР на хламидиоз может проводится также детям. Такое обследование допустимо даже для малышей небольшого возраста и новорожденных. Они могут легко подхватить эту инфекцию во время прохождения по родовым путям.

Расшифровка результатов

Общие выводы из полученных результатов после сдачи анализа может сделать и человек не обладающий специальными знаниями. Но составить верную схему лечения, если оно необходимо, может исключительно специалист.

При «отрицательном» результате можно говорить о полном отсутствии хламидий в организме человека. В таком случае причину недомогания (если пациента что-то беспокоит) следует искать в ином.

Но при наличии явной симптоматики хламидиоза и «отрицательном» результате анализа следует использовать иные методы диагностики или пересмотреть мнение о компетенции лабораторного учреждения, проводившего исследование.

Анализ со знаком « » подтверждает опасения — в организме присутствуют бактерии-возбудители хламидиоза. Но это не всегда означает наличие самого заболевания, так как хламидии присутствуют в организмах почти 60% здоровых людей.

Они могут активизироваться при наступлении благоприятных условий. Это означает что особой внимание следует уделять профилактике заболевания.

Количественная характеристика представителей патогенной микрофлоры определяется с помощью иных методов диагностики, например, культуральный анализ (бакпосев).

Анализ ПЦР – это качественный, а не количественный метод. Это означает, что результатом обследования является не число бактерий в собранном биоматериале, а наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов.

Протокол анализа ПЦР должен содержать ФИО пациента, дату проведения исследования, целевую бактерию и результат. Зачастую вместо словесной расшифровки результата ставится « » или «-».

В норме анализ ПЦР должен показывать «отрицательный» результат – отсутствие патогенных микроорганизмов. Но для максимальной достоверности врач может назначить ИФА анализ, который позволяет оперировать количественными, а не качественными показателями.

Анализ ИФА имеет 3 основных показателя: IGA, IGG и IGM, и нормой для каждого из них являются следующие цифровые характеристики:

  • для IGA: до 50;
  • для IGG: 100-400;
  • для IGM: до 50.
Таким образом, пациент может проходить через дополнительные процедуры для уточнения диагноза.

ПЦР на хламидии – необходимая процедура при подозрении на хламидиоз. Также ПЦР – исследование назначается в ряде других случаев. Преимущество метода заключается в высокой эффективности и достоверности, но для получения точного результата необходимо правильно подготовиться к забору биоматериала, а лаборант должен проводить процедуру без отклонения от правил.

ПЦР на хламидии при беременности

Когда врачи отравляют своих пациентов на анализ ПЦР, это всегда вызывает переживания. Однако для беременных женщин такое обследование всегда является серьезным расстройством. Нужно учитывать, что во время вынашивания плода каждая женщина максимально остро относится к состоянию своего здоровья.

Половые инфекции, проникшие в полость малого таза, способны серьезно подорвать здоровье беременной женщины. Кроме того, из-за них могут легко возникнуть серьезные отклонения в формировании внутренних органов плода, а также возникнуть выкидыш.

Чем раньше вам диагностируют хламидиоз и назначат эффективное лечение, тем выше шанс сохранить нормальное развитие у плода.

Анализ на ПЦР является составляющей частью обследования любой беременной женщины. Его проводят даже в том случае, если у женщины не менялся половой партнер на протяжении долгого времени. Помните, что хламидии способны долгое время жить в организме и не проявлять себя никакими симптомами.

Однако при получении результатов анализа многие люди отмечают, что когда-то сталкивались с определенным дискомфортом. Женщины же легко могут определить патологию по часто повторяющейся молочнице или постоянному дискомфорту во влагалище.

Недостатки методики

Как и любые методы исследования, мазок ПЦР на хламидии имеет и минусы.

Среди них:

  1. Стоимость «выше среднего». Методика подразумевает использование дорогостоящих реагентов и оборудования, что, естественно, отражается и на цене анализа. По этой причине этот метод диагностики доступен только в частных медицинских учреждениях.
  2. С помощью ПЦР практически невозможно определить активность хламидий на ранних этапах течения болезни. Использование методики целесообразно только при наличии воспалительного процесса, вызванного деятельностью патогенной микрофлоры.
  3. Жесткие условия в период перед сдачей анализа. При их несоблюдении нередкость появление ложноположительного или ложноотрицательного результата, что увеличивает стоимость обследование, так как требуется дополнительные процедуры.

Итог

На сегодняшний день, хламидиоз является одним из распространенных инфекционных заболеваний мочеполовой системы. И немалую роль в этом играют трудности в диагностике этой патологии.

Среди наиболее информативных, а главное достоверных, методик выявления хламидий в организме можно выделить ПЦР. Использование этого анализа способно с высокой точностью указать на наличие или отсутствие в организме этих представителей болезнетворной микрофлоры.


Поделитесь с друзьями!
Vk
Send
Klass